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血清說明書——儲存、解凍、使用方法

更新時間:2023-07-14  |  點擊率:818

一、血清的儲存


1、長期儲存:

血清在生產制備完成后,通過質量檢測,然后被運送至市場上銷售。整個過程中,包括運輸流程,儲存溫度應嚴格保證在-20℃,避免反復凍融影響血清活性。

實驗人員在收到血清,檢查完好后,及時將血清送至-20℃冰箱中儲存,用時再取出采用三步法解凍。

在未解凍的情況下,血清可長期儲存在在-20℃或-80℃環(huán)境中,只要是在保質期內,均能正常使用。

儲存過程中,需要定期監(jiān)控儲存血清的冰箱中,溫度是否符合規(guī)定,保證冰箱制冷效果(-20℃)是否正常,盡量避免出現溫度大幅度的波動的情況,防止血清因溫度變化而反復凍融的情況出現。

另外,盡量將血清獨立存放于一定區(qū)域(恒溫區(qū)域),避免反復開關冰箱門對儲存溫度造成影響。


2、在4℃冰箱中的儲存:

解凍后的血清,不宜在4℃冰箱中放置過久。

血清在生產加工運輸過程中,沒有添加外源抗菌成分。因此開封后,如果長期保存在使用頻率高且潔凈度差的4℃冰箱中,很容易染菌。

如果配制為培養(yǎng)基,添加了雙抗,可以在一定程度上減少培養(yǎng)基污染的風險,但是由于基礎培養(yǎng)基的添加,使得整體成分更為復雜,保存不當則會使有效物質活性降低。

因此,我們建議,添加了血清的培養(yǎng)基盡量做到現配現用;解凍后的血清不要長期儲存在4℃冰箱中,盡可能不要超過7天。


二、血清的解凍

當血清需要被解凍時,我們不建議大家把剛從-20℃中拿出的冰凍血清,直接放入4℃冰箱中過夜融化,也不要在室溫進行過夜解凍。

由于血清含有蛋白質等干物質,這類物質容易先融化析出,水這類溶劑后融化,導致血清產生沉淀,影響使用效果。

因此,要盡可能保證所有成分同步融化,因此我們建議使用三步法融化,具體步驟見下表。

需要注意的是,如果血清是儲存在-80℃冰箱中,三步法解凍前,應先將血清轉移至-20℃冰箱中存放1-2天。

一次解凍后,分裝至無菌離心管中,盡量保證每管是一次的用量,分裝管解凍也遵循三步法,解凍后需全部用完。




三、血清的使用

1、血清的熱滅活:

血清進行熱滅活的目的是,利用較高的溫度使補體失活。由于胎牛血清會嚴格控制采血時間為5-8月齡的胎牛,此時還未形成完整的補體系統,因此,合格的胎牛血清,是不需要滅活的。

但是實驗中如果需要新生牛血清、小牛血清、豬血清或馬血清這些血清時,則需要根據實驗要求而定。

根據血清廠家多年來總結的經驗,常規(guī)解凍后,40℃水浴加熱20分鐘即可,能夠盡可能地保留營養(yǎng)成分。

2、細胞培養(yǎng)的應用:

對于新的細胞系或從無血清培養(yǎng)轉變到胎牛血清培養(yǎng)的細胞系,需要進行適應期。在初始適應期,可以將血清濃度逐漸降低,直到細胞適應無血清培養(yǎng)為止。

3、關注血清的批次:

相同品牌的胎牛血清,在蛋白質含量等方面,可能會存在批次差異,因此在同一實驗中最好使用來自同一批次的血清,以減少變異性。如果不得不使用不同批次的胎牛血清,請進行驗證實驗以確保結果的可重復性。




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